SK-BR-3(人乳腺癌细胞)是1970年由TREMPE G和OLD LJ从一位43岁的白人女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离得到的。该细胞亚显微结构特征包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝;过表达HER2/C-ERB-2基因产物。


本文为大家介绍SK-BR-3细胞生长特性和常见问题解决策略。
一、培养条件
【培养体系】MCCOY'S 5A(CELLCOOK CAT:CM2002) 10%胎牛血清(南美进口级别)
【疾病】乳腺腺癌
【传代比例】不高于1:3传代(培养面积比)
【传代方式】消化2-3分钟
【换液频率】每周换液2-3次
【冻存液配方】MCCOY'S 5A+10%FBS+10%DMSO
二、生长特性
SK-BR-3细胞在复苏培养的第一周以及后续培养过程中都会出现松散贴壁和漂浮等情况。


SK-BR-3细胞复苏后恢复正常生长状态需要一定时间,可能会出现不贴壁漂浮的情况,这是正常现象。
复苏后几天内最好保持细胞不受干扰;在刚收到细胞时,可根据细胞密度进行传代,传代后3天若培养基无明显变化不要处理细胞,减少挪动。
如果仍然有很多漂浮物,可将漂浮的活细胞收集起来,通过轻轻离心保留漂浮细胞,并在更换培养基时将其与附着的细胞一起添加回同一培养容器中,不要分离或丢弃漂浮细胞。
细胞最初会以小团块的形式附着,许多细胞团仍处于悬浮状态,几天后,细胞将贴壁生长并向外延伸,有时也会出现一些细胞碎片,通过换液可去除。
三、注意事项
● 完全摊开需1天。
● 细胞传代不可过稀,1:3传代生长一代需5-6天。
● SK-BR-3细胞有聚团生长特性,汇合度达到70%-90%即可传代,如果细胞过度生长,就会分离漂浮。
● 若有大量漂浮的活细胞可以收集重新接种,切勿丢弃。